水質大腸菌群酶底物法檢測系統介紹

一、 檢測用途：

   酶底物法測定用途：用于檢測水中總大腸菌群糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）和大腸埃希氏菌。可用于檢測水的類型：飲用水、水源水、廢水、食品水、地表水、地下水、海水、瓶裝水、中水、二次供水、管網水、畜牧用水、醫療用水等。

二、檢測原理：

酶底物法采用 ONPG 和 MUG 兩種營養指示劑，這兩種試劑分別可以被大腸菌群的 β-半乳糖苷酶和大腸桿菌的 β-葡糖醛酸酶分解代謝。當大腸菌群在酶底物檢測試劑中生長時，其使用 β-半乳糖苷酶分解代謝 ONPG，并使樣品從無色變為黃色。大腸桿菌使用 β-葡糖醛酸酶分解代謝 MUG 時，能夠發出熒光。

三、 優勢特點：

酶底物法為GB5750-2006收錄的用于大腸桿菌檢測標準方法，酶底物法是目前水中大腸桿菌檢測的*先進方法，目前以其方便快捷，假陽性低，適用大量樣品快速檢測等優點正逐步被國內檢測部門所認可。

相對于多管發酵和濾膜法，酶底物法檢測步驟大大減少，而且對實驗環境要求不高，檢測時間可減少到24小時，在日常水樣監測及應急監測中具有很好的應用前景，可及時檢測，預防，*大限度的減少重大公共**事故的發生幾率。 以GB5750-2006中總大腸菌群測定為例，比較三種方法，如表所示。

表1 多管發酵法、濾膜法及酶底物法比較統計

方法優勢：

1.無需在無菌室內操作。

2.手工操作時間小于1分鐘。

3.無需培養基制備和大量玻璃器皿**。

4.24小時即可完成定性定量分析，無需驗證試驗。

已經列入

1.GB/T5750.12-2006《生活飲用水標準檢驗方法》微生物指標。

產品特點：

1.colitech酶底物法檢測試劑，LK定量檢測盤/定量孔板，LK定量瓶出廠前均已**，客戶可以直接放心使用。

2.colitech酶底物法檢測試劑是我公司潛心研制并符合GB/T5750.12-2006的酶底物法培養基，假陽性和假陰性均優于傳統方法。

3.colitech酶底物法檢測試劑經大量客戶實驗室使用和驗證，表明與傳統方法多管發酵法和濾膜法具有方法一致性和可比性。

準確/可信

● 使用MPN法進行定量檢測，可直接檢測100毫升水樣中1～2419MPN(個)目標**

● **檢出100ml水樣中單個的活性大腸桿菌群和大腸埃希氏菌,假陰性低

● 每個單位試劑可抑制上百萬個異養**，假陽性低

● 無需驗證試驗，準確性高于濾膜法及多管發酵法

● 符合中國國家標準GB/T5750.12－2006《生活飲用水檢驗標準》

簡單/快捷

● 檢測時間不超過24小時，無需確證試驗

● 簡單培訓就能輕松使用，手工操作少于一分鐘

● 不會因為過濾阻塞(濾膜法)或異養細胞的干擾(多管發酵法)而產生數據誤差

● 無需玻璃器皿清洗及菌落計數，減輕實驗人員工作量

● 適用于大量樣品的批量快速檢測

四、 配件以及技術方案：

   針對酶底物法檢測的原理采購相應的設備。用途如下：

程控定量封口機：用于定量檢測盤的封口。

酶底物檢測試劑：用于選擇性檢測水中的目標**。

51或97定量檢測盤：用于判斷目標微生物數量。

100毫升定量瓶/取樣瓶：專業的為水樣與試劑提供溶解環境。

紫外手持式紫外分析儀帶暗室：測定大腸埃希氏菌時用于在暗室中觀察熒光。

五、 操作方法：

**步：將水樣加入100ml取樣瓶中，加入酶底物法檢測試劑，擰緊蓋子搖勻至完全溶解。

**步：將樣品加到定量檢測盤中。

第三步：使用程控定量封口機對定量檢測盤進行樣品分配及封口

第四步：將封口好的定量檢測盤放在36±1℃，如需測定糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）則將培養箱設定為44.5℃，培養24h.

第五步：對照比色盤數陽性（顯黃色，或熒光）格子數，按照使用的檢測盤類型，分別查51孔或者97孔MPN表得出100毫升中大腸菌群的菌群數。對照MPN表出數據。

第六步：根據稀釋倍數*終結果按公式計算結果

大腸菌群(個/L)=MPN值×稀釋倍數×1000mL/100mL